繰り返し漂白は,コア施設の染色自動化を使用して多重性を拡張します
Anna E Tseng1, Aoife O'Connell2, Aaron Benhamou3
1National Emerging Infectious Diseases Laboratories (NEIDL), Boston University; Department of Pathology and Laboratory Medicine, Boston University Chobanian and Avedisian School of Medicine.
自動リテラティブ・ブリーチ エクステンズ・マルチプリシティ (IBEX) は,組織内のタンパク質分析を強化します. このタイラミド信号増幅技術は,オートステイナーを使用するコア施設のスループットと再現性を改善します.
科学分野:
- バイオメディカルイメージング
- 分子病理学
- 免疫ヒストケミストリー
背景:
- Iterative Bleaching Extends Multiplicity (IBEX) は,タイラミド信号増幅 (TSA) ベースの技術で,単一の組織サンプルで複数のタンパク質を画像化します.
- 現在のIBEXの実装には,しばしば手作業が必要で,スループットと再現性を制限しています.
- IBEXの自動化は,効率と標準化を大幅に高めることができます.
研究 の 目的:
- 自動化されたIBEXが一般的な自動スタイナープラットフォームで成功していることを示します.
- フォーマルリン固定,パラフィン埋め込み (FFPE) 組織のためのIBEXパネルの設計のための最適化戦略を提供する.
- コア病理学施設のワークフローに自動化されたIBEXを統合するためのガイド.
主な方法:
- IBEXを2つの異なるオートステイナープラットフォームで実装する.
- パネル設計のための抗体-抗原回収感受性のテストのための方法論の開発.
- 全スライドスキャナーを使って画像を撮り, 細胞フェノタイプ化ソフトウェアを使って分析する.
主要な成果:
- 自動化IBEXを2つの自動スタイナープラットフォームで成功させた.
- FFPEサンプルにおけるTSAベースのパネルの設計に関する詳細な検討,抗体-抗原回収感度試験を含む.
- 商用全スライドスキャナーと細胞フェノタイプソフトを使用した下流画像と分析の実証.
結論:
- 自動化されたIBEXは汎用性があり,既存のコア施設の自動トレーニングプラットフォームに容易に統合できます.
- この研究は,IBEXの実装とパネルの設計を最適化するための実践的なガイドラインと方法論を提供します.
- IBEXの自動化は,複合タンパク質解析のスループット,再現性,効率性を向上させます.
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