コンドロゲン結合中のmiR-335-5pとmiR-1246の早期調節によるタイプIIとXのコラーゲン堆積のドナー依存的調節

科学分野:

• 骨の再生のバイオ分子機構
• 骨格の発達における細胞の分化
• 組織修復におけるマイクロRNAの調節

背景:

• 骨折患者の10%に遅れた結合と非結合が影響し,予測バイオマーカーの必要性を強調しています.
• 骨の再生の重要な経路である内軟骨の骨化には軟骨の中間体が含まれます
• 前述の血清マイクロRNA (miR- 1246 , miR- 335 - 5p , miR- 193a - 5p) は,内分泌骨格化における機能的検証を必要とする.

研究 の 目的:

• miR-1246,miR-335-5p,miR-193a-5pのインビトロ内分化における役割を調査する.
• 人間の骨髄由来メゼンキマ・ストロマ細胞 (BMSCs) を用いて早期の内分泌骨格形成をモデル化する.
• マイクロRNA抑制がコンドロゲンと高縮性の分化プロセスに与える影響を評価する.

主な方法:

• ヒトBMSCにおけるmiR- 1246 ,miR- 335 - 5p ,およびmiR- 193a - 5pの一時的な阻害は,コンドロゲネシス以前に発生する.
• ヒスト学的分析 (サフラニンO/ファストグリーン) と免疫ヒスト化学 (コラーゲンIIおよびX) で差異化が評価される.
• 分子変化を特定するために,大量RNA配列とRT-qPCRを用いた遺伝子発現プロファイリング.

主要な成果:

• miR-1246とmiR-335-5pの抑制は,5人のドナーのうち3人のBMSCでコンドロゲンと高縮性の分化を促進した.
• miR- 335 - 5pの抑制は,GDF5とCCN5の有意な上昇と,反応したドナーにおけるSKILの低下をもたらした.
• マイクロRNA抑制に対するドナー固有の反応が観察され,コンドロゲネシスの調節の変動を示した.

結論:

• miR-335-5pとmiR-1246は,内分泌の骨化に作用する.
• miR-335-5pによって調節される遺伝子は,TGF-βシグナル伝達経路に関与している.
• 骨折の治癒のための予後マーカーとしてこれらのマイクロRNAの臨床的有用性を調べるためにさらなる研究が必要である.