AAV5,AAV8,およびAAV9ベクトルの静脈投与後のサルにおけるクロス反応性アデノ関連ウイルス抗体のバイコア分析

科学分野:

• 遺伝子療法
• 免疫学
• ウイルス学

背景:

• アデノ関連ウイルス (AAV) ベクターは遺伝子治療の提供に不可欠です.
• 既存のまたは治療によって誘発された抗AAV抗体は,ベクトルの再投与を防ぐことにより,遺伝子療法の有効性を妨げる可能性があります.
• 抗AAV抗体の交叉反応性を理解することは,遺伝子治療の戦略を最適化するために不可欠です.

研究 の 目的:

• アデノ関連ウイルスの血清型5,8,9 (AAV5,AAV8,AAV9) に対して生成された抗体の交叉反応性を調査する.
• 初期被曝後に異なるAAV血清型の再投与の可能性を評価する.
• 抗AAV抗体の反応を特徴づけるために,ビアコア表面プラズモン共鳴 (SPR) ベースの測定法の有用性を評価する.

主な方法:

• プラズマにおける抗AAV抗体の検出と定量化のためのBiacore SPRベースの全結合抗体 (TAb) 測定法の開発.
• AAV5,AAV8,AAV9ベクトルを結合測定のためのセンサーチップに固定する.
• AAVベクトルの投与から29日後にCynomolgus猿の血サンプルを分析して,抗体レベルとクロス反応性を決定する.
• 免疫グロブリン (Ig) の同型 (IgGとIgM) を,抗猿抗体を用いて区別する.

主要な成果:

• AAV8とAAV9に対する抗体間の重要なクロスリアクティビティがBiacoreアッセイで検出されました.
• AAV5に対する抗体と,AAV8またはAAV9に対する抗体間のクロスリアクティビティは最小でした.
• IgGとIgMの両方の抗AAV抗体は,ベクター投与の29日後に存在した.
• 抗体プロファイルのBiacoreとELISAプラットフォームの結果は比較可能で,SPRアッセイを検証した.

結論:

• 抗AAV5抗体は,AAV8およびAAV9ベクトルとのクロス反応性が最小で,その逆もそうです.
• 限られた交叉反応性から,最初の治療後に異なるAAV血清型の再投与が可能である可能性が示唆される.
• Biacore SPRアッセイは,抗AAV抗体応答と遺伝子治療の文脈におけるクロス反応性を評価するための信頼できる方法である.