CRISPR/Cas9 - 異動性脳卒中における移植された神経原始細胞のモニタリングのための三重融合レポーター遺伝子イメージングシステム

科学分野:

• 再生医療
• 分子イメージング
• 神経科学

背景:

• 神経前駆細胞治療は 発血性脳卒中の修復に有望です
• 分子画像は細胞治療の有効性を評価するために不可欠です.
• 血脳障壁は 移植された細胞の 効果的なイメージングを妨げます

研究 の 目的:

• ヒト神経原生細胞 (hNPC) の移植の長期モニタリングの方法を開発し,不全性脳卒中を患ったラットモデルに用いること.
• CRISPR/Cas9によるトリプル・フュージョン (TF) レポーター遺伝子システムとアデノシン・アゴニスティック・ミセル (AM) ベースのプローブ・デリバリー戦略を組み合わせる.
• hNPCの非侵襲的な in vivo トラッキングを可能にします.

主な方法:

• hNPCでCRISPR/Cas9で設計されたTFレポーター遺伝子システムを利用した.
• アデノシンアゴニスティックミセル (AM) ベースのプロンブ配送戦略を採用した.
• 移植されたTF-hNPCをマウスの脳卒中モデルでMRI,生物発光画像,PET/CTを用いて8週間間モニタリングした.

主要な成果:

• TF-hNPCは,不血性ネズミの脳内での増殖と成熟を示した.
• TF-hNPCの成功した in vivo トラッキングは,移住と分化を示した.
• TF-hNPCの移植により,血栓不全領域のグルコース吸収が改善され,神経学的欠陥が軽減されました.

結論:

• CRISPR/Cas9で設計されたTFレポーター遺伝子イメージングシステムは,AMベースのアプローチと組み合わせて,移植されたhNPCの有効なインビオモニタリングを可能にします.
• この戦略は血脳障壁の限界を克服し,不全性脳卒中における神経原始細胞移植を評価します.
• 開発されたシステムは,臨床前脳卒中のモデルにおける細胞治療の有効性の長期的評価を容易にする.