エフェクタドメインの削除による自然に発生するNS1変種は,インフルエンザウイルス感染において成長上の利点を得ている

科学分野:

• ウイルス学
• 免疫学
• 分子生物学

背景:

• 高病原性鳥インフルエンザウイルス (HPAIV) は,家禽および公衆衛生に重大なリスクをもたらす.
• ウイルスの非構造タンパク質1 (NS1) は,宿主の先天的免疫に対抗するHPAIVの能力にとって極めて重要です.
• NS1タンパク質は通常,RNA結合ドメイン (RBD) とエフェクタドメイン (ED) を含む.

研究 の 目的:

• エフェクタドメインが欠けている新しい自然発生のNS1変種 (NS100) を特徴付ける.
• ウイルスの複製と免疫回避に対する NS100 の機能的影響を調査する.
• NS1のプロウイルス機能の維持におけるRBDの役割を調査する.

主な方法:

• NS100変種をコードする再結合H5N2ウイルスの分離と拡散.
• 細胞および動物モデルでのウイルス複製アッセイ.
• 感染した細胞におけるインターフェロンとサイトカイン発現の分析
• dsRNA結合,PKR相互作用,ホモディマー形成を評価する生化学的測定法.
• ウイルスのRNAポリメラーゼとの協力性を評価するためのミニゲノムアッセイ
• NS2タンパク質発現とRNAスプライシング効率の分析
• 感染した細胞のトランスクリプトーム分析

主要な成果:

• NS100ウイルスは,野生型 (WT) ウイルスに匹敵する効率的に複製されました.
• NS100に感染した細胞はインターフェロンとサイトカインの発現が低下し,免疫回避が維持されたことを示した.
• dsRNA結合とPKR相互作用を含むRBD媒介の重要な機能をNS100は維持した.
• NS100はウイルスのRNAポリメラーゼと機能的相乗効果を示した.
• NS100ウイルスは,スプライシングの障害によるNS2タンパク質発現の低下を示した.
• トランスクリプトーム解析は,スプライシング効率の低下と抗ウイルス宿主遺伝子の発現の低下を確認した.

結論:

• NS1タンパク質は,エフェクタドメインなしで,免疫回避を含む重要なプロウイルス機能を保持できます.
• NS1のRNA結合ドメインは,効率的なウイルスの複製に必要な重要な機能に十分である.
• NS100変種は,NS1のモジュラー性とその宿主ウイルスとの相互作用における規制的役割についての洞察を提供します.