Streptococcus thermophilusの予行スクリーニングされた強いプロモーターを使用して,ニシン制御表現ベクトルの構築と最適化
Yanxin Ye1, Ruiting Zhao2, Leilei Li1
1School of Life Science and Engineering, Henan University of Urban Construction, Pingdingshan, China.
Frontiers in microbiology
|September 3, 2025
まとめ
研究者らは,Streptococcus thermophilusのニシン制御遺伝子発現 (NICE) システムを改善しました. 誘導可能な発現ベクトルとプロモーターを最適化し,P25プロモーターで最高発現を達成することで,タンパク質の生産を向上させた.
科学分野:
- 微生物学
- 分子生物学
- バイオテクノロジー
背景:
- ニシン制御遺伝子発現 (NICE) システムは,ラクトコッカス・ラクティスの遺伝子発現に有効である.
- Streptococcus thermophilusのような他の乳酸細菌の遺伝子発現システムを強化することは,バイオテクノロジーの応用にとって極めて重要です.
研究 の 目的:
- NICEシステムを最適化して,Streptococcus thermophilus ATCC19258のタンパク質発現を強化する.
- ヘテロログのタンパク質生成のための誘導表現ベクトルの構築と評価.
主な方法:
- NICEシステムのコンポーネントを使用して誘導表現ベクトルpNZ8148-PnisA-gfp-PnisR-nisR-nisKの構築.
- 矢器をStreptococcus thermophilus,Lactobacillus plantarum,およびEnterococcus faeciumに分解する
- 最大のタンパク質発現のためのニシン誘導濃度と時間の最適化
- 固有のPnisRプロモーターを強いStreptococcus thermophilusプロモーター (P15,P18,P23,P25) で置き換える.
主要な成果:
- NICEシステムは複数の乳酸バクテリアの宿主で タンパク質の生成を成功させました
- Streptococcus thermophilusの最適誘導条件は,3時間間の2500ng/ mlのニシンと決定された.
- P25プロモーター (pNZ8148-PnisA-gfp-P25-nisR-nisK) を利用した再結合プラズミッドは,最も高い緑色光タンパク質 (GFP) 発現レベルをもたらしました.
結論:
- 改造されたNICEシステムは,様々な乳酸バクテリアに広く適用できることを示しています.
- 強力な,事前スクリーニングされたプロモーター (P25) の使用は,ストレプトコッカス・サーモフィルスにおける異質タンパク質発現を著しく強化する.
- 改良されたプラズミドベースのNICEシステムは,Streptococcus thermophilusで効率的な再結合タンパク質の生産の可能性を持っています.
