鶏とアヒルの気管輪と精密切断された肺切片の冷凍保存:鳥インフルエンザウイルスの迅速な特徴づけのための有望なツール

科学分野:

• 獣医ウイルス学
• 感染症 研究
• 動物保健

背景:

• 高病原性鳥インフルエンザ (HPAI) ウイルスは,特にA/Goose/Guangdong/1/96系は,2020-2021年のH5N1パンゾオティックを含む世界的な流行を引き起こしました.
• ウイルスの再分類により,多種多様なHPAI現象型が生じ,家禽と野生の鳥の効果的な制御のために,継続的なモニタリングと特徴づけが求められています.
• 鳥インフルエンザウイルス (AIV) 研究の従来型のインビボモデルは資源が密集しており,代替方法が必要である.

研究 の 目的:

• AIVの急速なフェノタイプ化のために,冷凍保存されたex vivo組織プラットフォーム,特に鶏とアヒルの気道臓器培養 (TOC) と精密切断された肺スライス (PCLS) を最適化し,検証する.
• 凍結保存された組織の生存能力,整体性,AIV感染に対する感受性を評価する.
• これらの冷凍保存のプラットフォームの有用性を評価し,適性と宿主好みに基づいてAIV株を区別する.

主な方法:

• 鶏とアヒルの気道臓器培養 (cTOC,dTOC) と精密切断肺スライス (cPCLS,dPCLS) のエクスプラント生産と冷凍保存プロトコルの最適化
• 溶解後の生存能力,組織学的完全性,冷凍保存された組織におけるAIV感染に対する感受性の評価.
• ディメチル硫化物 (DMSO) と胎児牛血清 (FBS) による冷凍保存溶液によるトレハロースの補給も評価された.

主要な成果:

• トレハロースは,冷凍保存された鶏とアヒルの臓器培養物の生存能力を著しく高めました.
• 凍結保存された組織は,新鮮なエキスプラントと比較して生存能力が低下したが,同様のウイルス複製レベルを維持し,AIV感染に対する感受性がわずかに低下しただけであった.
• 凍結保存されたアヒルのTOCと鶏のTOCは,異なる体格と宿主トロピズムに基づいてAIVを成功裏に区別しました.

結論:

• 凍結保存された気管臓器培養と精密切断された肺切片は,新興の鳥インフルエンザウイルスの急速な現象的特徴化のための有望で標準化されたex vivoプラットフォームを表しています.
• これらの最適化された組織モデルは,AIV研究における in vivo 試験の費用対効果が高く,倫理的に健全な代替案です.
• 検証された冷凍保存プロトコルは,HPAIの診断と監視の改善ツールの開発を容易にする.