原生タンパク質と分子接着剤の相互作用の安定化: 14-3-3 ケーススタディ

科学分野:

• 化学生物学
• 薬物の発見
• 構造生物学

背景:

• タンパク質とタンパク質の相互作用 (PPI) は細胞機能に不可欠ですが,治療的に標的化することは困難です.
• 分子接着剤 (MGs) は,PPIを調節するための新しいアプローチを提供し,特に本質的に乱れたドメインを含むものです.
• 多くのシグナル伝達経路の重要なレギュラーである 14-3-3 タンパク質ファミリーをターゲットにすることが重要な機会です

研究 の 目的:

• 原生PPIの分子接着剤を特定し,最適化するための体系的かつ合理的なアプローチを開発する.
• 14-3-3/エストロゲン受容体α (ERα) と14-3-3/C-RAFタンパク質複合体を標的とするクラスの最初の分子接着剤を作成する.
• より広範な14-3-3インタラクトームおよびそれ以上のものに適用されるMGsの発見のための汎用性のあるプラットフォームを確立する.

主な方法:

• フラグメントベースのスクリーニングとジスルファイドテザリング技術は,初期化学物質を特定するために使用されました.
• 構造による設計と薬剤化学の最適化は,リガンド- タンパク質の相互作用を強化するために使用されました.
• 生物学的測定法 (質量スペクトロメトリー,光アニソトロピー) と細胞測定法 (NanoBRET) が検証に使用された.

主要な成果:

• 14-3-3/クライアントの選択的および非選択的断片の識別
• 14-3-3/ERαと14-3-3/C-RAFを標的とする細胞活性分子接着剤の開発.
• MG最適化のための断片リンク,エスカフォールドホッピング,断片合併戦略の実証.

結論:

• 固有のPPIの分子接着剤の発見のための体系的なプラットフォームが確立されています.
• 14-3-3/ERαおよび14-3-3/C-RAF複合体の分子接着剤が初めて開発されました.
• このプラットフォームは,病気に関連する幅広いタンパク質相互作用をターゲットにすることを約束しています.