VEGFを標的にする合成ヒト化カメリド・シングル・ドメイン抗体は,in vitroで血管新生抑制効果を示している

科学分野:

• バイオテクノロジー
• 免疫学
• 分子生物学

背景:

• 血管内皮成長因子 (VEGF) は,がんや網膜障害などの疾患において極めて重要です.
• VEGFは20年以上前から 重要な治療目標となっています
• VEGFをターゲットにすることで 血管新生に関連する病理を治療する可能性を秘めています

研究 の 目的:

• VEGFを標的にする新型,合成,親和性成熟の単一ドメイン抗体断片 (VHH) を分離し,特徴づけること.
• VEGFに対する既知のVHH (NbBCII10_FGLA) の親和性を高めるために.
• エンジニアリングされたVHHの治療的可能性を評価する.

主な方法:

• 多様化されたCDR領域 (CDR3,CDR1,CDR2) を含むファージ表示ライブラリの構築
• VEGFアイソフォーム121に対する3ラウンドのバイオパンニングによるVEGF標的VHHの選択
• 選択されたVHH (NbH1) の特徴付けは,親和性アッセイ,分子モデリング,ELISA,およびin vitro血管新生モデルを使用しています.

主要な成果:

• 合成VHHであるNbH1を分離し,ヒトのVEGFに対する親和度は,原始VHHと比較して4倍に増加した.
• NbH1は溶解性と熱安定性を維持することが示された.
• NbH1は,VEGFとVEGFR2の相互作用を効果的に妨害し,VEGFR2のリン酸化を抑制し,内皮細胞の発芽を減少させた.
• NbH1は種間活性を示し,VEGFR1結合に干渉しませんでした.

結論:

• NbH1は,VEGF活性に対する強力な高親和性VHH阻害剤です.
• エンジニアリングされたVHHは,病理的血管新生の治療において,治療的な応用が有望であることを示しています.
• NbH1は,VEGF媒介性疾患と戦うための新しい分子ツールです.