ミコバクテリアのプロファージでコードされたLysinBのペプチドグリカン結合ドメインは,ヒドローラゼにおけるドメイン保存のための多様なアプローチを明らかにする
Ritam Das1, Kanika Nadar2, Ritu Arora2
1Faculty of Biological Sciences, Friedrich Schiller University, Jena, 07737, Germany; Department of Life Science, Acharya Narendra Dev College, University of Delhi, Govindpuri, Kalkaji, 110019, New Delhi, India; Department of Biology, Chemistry, Pharmacy, Freie Universität Berlin, Berlin, Germany.
Mycobacterium fortuitumのファグから LysinB_MFという 新しい酵素を特徴付けました この酵素はバクテリアの細胞壁を標的とし,その結合領域が欠けている変種は,著しく高い活性を示した.
科学分野:
- 生物化学と分子生物学
- 微生物学とウイルス学
- 構造生物学
背景:
- ミコバクテリオファージでコードされたLysinB酵素は,ミコバクテリアの細胞壁を標的とするのに不可欠です.
- これらの酵素は通常球状の構造を持ち,ミコリルエステル結合を裂く.
- 新種のLysinBの多様性を理解することは,新しい抗菌薬戦略の開発の鍵です.
研究 の 目的:
- 新しい Mycobacterium fortuitum プロファージでコードされた LysinB (LysinB_MF) を構造的に,機能的に特徴づける.
- 酵素活性と構造におけるペプチドーガン結合領域 (PGBD) の役割を調査する.
- 水酸化酵素におけるPGBDの進化的意義を探求する.
主な方法:
- 完全な長さのLysinB_MFとそのPGBD断片化された変数の構造的および機能的特徴.
- ミコバクテリアの標的に対するエステラーゼの活性測定法
- PGBD配列の構造的比較と遺伝子解析を含むバイオ情報分析
主要な成果:
- LysinB_MFはα/βヒドロラーゼ領域と,保存された触媒三角形を持つ明確なPGBDを有している.
- LysinB_MFの全長と断片は,M. smegmatisとM. fortuitumに対する抗菌作用を示した.
- PGBDを欠いたLysinB_MFは,全長酵素と比較してエステラーゼ活性が3倍に増加した.
- PGBDは他の酵素の細胞壁結合ドメインと構造的に類似しており,ドメインの移動性を示唆している.
- PGBDは広範囲に広がり,様々な水溶質に保存され,重要な構造的多様性を表しています.
結論:
- LysinB_MFは,抗菌薬として応用可能な新しいモジュール型酵素です.
- PGBDは結合に寄与しながら,水酸化ドメインの触媒効率を調節する可能性があります.
- PGBDは進化的に重要なタンパク質モジュールで,様々な機能を持つ酵素に含まれています.
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