アブシシ酸を用いてトキソプラズマ・ゴンディの感染性を研究する in vitro 試験の開発

科学分野:

• 寄生虫学
• 分子生物学
• 食品の安全性

背景:

• トキソプラズマ・ゴンディは 人や動物に感染する 広範囲に広がる寄生虫です
• トキソプラズマ症は重篤な病気を引き起こし,感染はしばしば汚染された食品を通して感染します.
• マウスバイオアッセイのような肉の寄生虫感染性を検出する現在の方法は時間がかかります.

研究 の 目的:

• トキソプラズマ・ゴンディの組織キストの感染性を in vitro 細胞培養法で開発し,検証する.
• 寄生虫検出の強化における植物ホルモンアブシシ酸 (ABA) の有効性を評価する.
• 肉の検査における従来のバイオアッセイに より迅速で効率的な代替手段を提供すること

主な方法:

• 人間の前皮線維芽細胞 (HFF) 培養物はT. gondiiのブラディゾイトに感染した.
• アブシシ酸 (ABA) は様々な濃度 (0. 220 ng/ μl) と化時間 (218 h) で投与された.
• 定量ポリメラーゼ連鎖反応 (qPCR) を用いて,感染後48時間の細胞培養でT. gondiiのDNAを測定した.

主要な成果:

• ABA治療は,細胞培養における寄生虫のDNA複製数を有意に増加させた.
• 最適な寄生虫の増殖は,ABAを2ng/μlで4〜6時間,または20ng/μlで2時間投与したときに観察された.
• 確立された in vitro 測定は,T. gondii キストの感染性の決定に適性を示した.

結論:

• 新しい,qPCRベースの in vitro 測定法により,組織キストにおける T. gondii の感染性を効果的に決定します.
• ABA治療は寄生虫の検出を強化し,測定の感度を改善します.
• このアッセイは,食品安全と寄生虫診断の従来の方法の有望な代替手段です.