癌バイオマーカーの分析のためのプラズマからライソファスファディチルコリンの単段階,クロロフォームフリー抽出
Rebecca Vieth1, Marilena Wittmaack1, Birthe Gericke1
1Institute of Pharmacy and Molecular Biotechnology, University of Heidelberg, Germany.
まとめ
リスオファスファディチルコリン (LPC) の新しい1段階の迅速抽出法が開発されました. この効率的なプロトコルは 有毒な溶媒を避け 臨床用途のバイオマーカーの分析を大幅に加速します
科学分野:
- リピドミクス
- 生物化学
- 分析化学
背景:
- リソファスファディチルコリン (LPC) の脂質周回と癌における役割は,まだ完全に理解されていません.
- LPCを臨床バイオマーカーとして利用するには,効率的な血および組織抽出が不可欠です.
- Bligh & Dyerのような既存の方法は 時間のかかるもので 危険なハロゲン溶媒を使用しています
研究 の 目的:
- LPCのための新しい,迅速で,溶媒効率の良い抽出プロトコルの開発.
- ICH M10のガイドラインに従って,バイオアナリティカルアプリケーションのための新しい方法を検証する.
- 新しい方法の効率と回収を確立された Bligh & Dyer 方法と比較する.
主な方法:
- 飽和アモニアムアセテートとアセトニトリル:イソプロパノールエリューエントを用いた1段階の塩による抽出.
- 液体染色体-タンデム質量スペクトロメトリー (LC-MS/MS) によって抽出されたLPC種の定量化.
- ICH M10ガイドラインに従って検証し,内部標準としてLPC 19:0を使用します.
主要な成果:
- 新しいプロトコルでは 抽出時間は18分で 伝統的な方法よりかなり速いのです
- 有毒なハロゲン溶剤の使用を避け,安全性と環境への影響を高めます.
- この方法は,Bligh & Dyer (87.5%) と比較して統計的に有意な回復率 (93.2%) を示した.
結論:
- 開発された塩による1段階抽出は,LPC分析の強固で迅速で効率的な代替手段です.
- この方法は,臨床でのバイオマーカーとしてのLPCの使用を容易にする.
- このプロトコルの適用性は,健康なボランティアの血を分析した試験試験で確認された.


