EGFR変異を二値検出する循環腫瘍細胞のフローサイトメトリープロトコルの確立

科学分野:

• 腫瘍学
• プロテオミクス
• 分子診断学

背景:

• 非小細胞肺癌（NSCLC）におけるEGFR変異は、チロシンキナーゼ阻害剤（TKI）への反応を予測します。
• 現在のEGFR変異検出には、侵襲的な腫瘍生検が必要です。
• 循環腫瘍細胞（CTC）を使用した、EGFR変異プロファイリングのためのより侵襲性の低い方法が必要です。

研究 の 目的:

• NSCLC患者におけるEGFR非侵襲的変異プロファイリングの使用の実現可能性を評価すること。
• CTCにおけるEGFR L858R変異を検出するためのフローサイトメトリーベースのプロテオミクスアッセイを開発および検証すること。

主な方法:

• EGFR L858R保有CTCを検出するためのフローサイトメトリー法を確立しました。
• 方法の最適化のために、健康なドナーの血液にNCI-H1975細胞をスパイクしました。
• この方法を21人のNSCLC患者と10人の健康なドナーの血液サンプルに適用しました。

主要な成果:

• アッセイは、この変異を持つすべての7人の患者でEGFR L858R保有CTCを特定しました。
• この方法は、PCRと比較して100％の陽性一致率と71％の陰性一致率を示しました。
• EGFR野生型と分類された3人の患者でEGFR L858R保有CTCを検出し、そのうち2人はEGFR-TKIの部分奏効を経験しました。

結論:

• CTCにおけるEGFR二値変異検出のための実現可能で、より侵襲性の低いプロテオミクスアプローチが開発されました。
• この方法は、EGFR-TKI療法に適格なNSCLC患者を特定するための新しい手段を提供します。
• CTC分析は、癌診断における非侵襲的な分子プロファイリングに有望です。