スイッチ可能なレンチウイルスベクターのVSV-G結合アダプター分子を介したリターゲティング

科学分野:

• 遺伝子治療
• 分子生物学
• バイオテクノロジー

背景:

• 選択的な遺伝子送達は、レンチウイルスベクター（LV）遺伝子治療にとって重要です。
• VSV-G偽型化はLV感染性を高めますが、普遍的な低密度リポタンパク質受容体（LDLR）発現による細胞特異性の欠如。
• 特定の細胞集団を標的とすることは、VSV-G偽型LVの広範な向性を克服する必要があります。

研究 の 目的:

• VSV-G偽型LVのためのモジュール式で受容体特異的なターゲティングシステムを開発すること。
• 標的遺伝子送達を可能にしながら、生産効率を維持する二機能性アダプターを作成すること。
• ERBB2発現細胞へのLVのリターゲティングにおける929-B6アダプターの有効性を評価すること。

主な方法:

• VSV-G結合ナノボディとERBB2結合DARPinを組み合わせた二機能性アダプター（929-B6）を設計しました。
• アルパカ免疫ライブラリから抗VSV-Gナノボディを生成およびスクリーニングしました。
• ERBB2陽性および陰性細胞株、およびマウス異種移植モデルで929-B6リターゲティングLV（野生型および受容体欠損型VSV-G）を評価しました。

主要な成果:

• 929-B6アダプターは、ERBB2発現細胞の効率的かつ特異的な形質導入を可能にしました。
• 929-B6によるプレインキュベーションは、ERBB2+細胞におけるLV形質導入を最大8倍増加させました。
• 形質導入の増加は、乳癌細胞株におけるERBB2表面密度と相関していました。
• invivoイメージングは、929-B6修飾LVで治療されたERBB2+腫瘍における腫瘍局在性シグナルを示しました。

結論:

• 929-B6アダプターは、標準的なLVストックを特定の受容体にリターゲティングするための、迅速でスケーラブルな方法を提供します。
• このアプローチは、ウイルスエンベロープの再設計またはコパッケージングプラスミドを回避します。
• 929-B6のモジュール性は、定義された向性を必要とする遺伝子治療および腫瘍溶解性アプリケーションのための汎用性の高いプラットフォームを提供します。