Macrobrachium rosenbergiiにおけるCRISPR/Cas9ゲノム編集システムの確立

科学分野:

• 水産養殖および水生ゲノミクス
• 遺伝子編集技術

背景:

• 巨大淡水エビ（Macrobrachium rosenbergii）は、世界的に価値のある養殖種です。
• M. rosenbergiiの遺伝的改良は、効率的なゲノム編集ワークフローの欠如によって妨げられています。

研究 の 目的:

• M. rosenbergii胚における標的変異誘発のためのCRISPR/Cas9マイクロインジェクションシステムの最適化。
• M. rosenbergiiにおける機能ゲノミクスおよび遺伝的改良の基盤確立。

主な方法:

• 1細胞期のM. rosenbergii胚を日常的に採取するために、管理された交配戦略を使用しました。
• 最適なマイクロインジェクション時期（受精後0.5〜2時間）および針先サイズ（約1μm）を決定しました。
• MrPAX6（眼発生遺伝子）およびMrIAG（性関連遺伝子）を編集するためにCRISPR/Cas9を適用しました。

主要な成果:

• 最適化されたマイクロインジェクション技術により、初期胚の死亡率を約10%に低減しました。
• MrPAX6の編集により、46.9%の変異率と眼色素面積の50%の減少が達成されました。
• MrIAGの編集により、84%の変異率と孵化までの生存率約35%が達成されました。

結論:

• M. rosenbergiiのための効率的かつ再現可能なCRISPR/Cas9ゲノム編集システムが正常に確立されました。
• この最適化されたシステムは、M. rosenbergiiにおける将来の機能ゲノミクス研究および遺伝的改良プログラムに不可欠なツールを提供します。