mAbs連続沈殿プロセスにおけるフロー スルー研磨操作開発のためのサイズ排除クロマトグラフィーフィンガープリンティングワークフロー

科学分野:

• バイオテクノロジー
• バイオ医薬品製造
• 下流処理

背景:

• モノクローナル抗体（mAb）の精製は、しばしば複雑な多段階プロセスに依存している。
• 既存の方法は、下流処理（DSP）におけるボトルネックとなる可能性がある。
• フロー スルー研磨は、潜在的な強化戦略を提供する。

研究 の 目的:

• mAbの2段階フロー スルー研磨プロセスのためのワークフローを開発および検証すること。
• モノマー収率と不純物除去の同時評価のための指標を確立すること。
• フロー スルーモードでの活性炭と多峰性陰イオン交換（MMA）樹脂の効果を実証すること。

主な方法:

• サイズ排除クロマトグラフィー（SEC）フィンガープリンティングとパーセントSECクリアランス（PSC）指標を開発した。
• バッチスラリープレートスクリーンを使用して、活性炭とMMA樹脂をスクリーニングした。
• 単一カラム、高負荷フロー スルー実験で候補材料を評価した。
• 低分子量（LMW）および高分子量（HMW）不純物に対する性能を評価した。

主要な成果:

• 活性炭は、酸性、低伝導度条件下で低分子量（LMW）不純物を効果的に除去した。
• MMA樹脂は、後続のステップで補完的なLMWおよび高分子量（HMW）不純物クリアランスを提供した。
• 80-87%のmAb回収率を達成し、HMW種を1.1%に、宿主細胞タンパク質を40 ppm未満に低減した。
• SECフィンガープリンティングは、スクリーニング方法論を検証する、直交する不純物除去を特定した。

結論:

• SECベースの不純物プロファイリングとPSC指標は、フロー スルー研磨プロセス開発を効果的に導く。
• 活性炭とMMA樹脂を用いた2段階フロー スループロセスは、mAb精製のための実行可能な戦略である。
• このアプローチは、DSPを強化し、ボトルネックを緩和し、アフィニティキャプチャへの依存を減らす。
• バイオテクノロジー
• バイオ医薬品製造
• 下流処理