INFOGEST消化液調製の最適化：Caco-2細胞モデルを用いた栄養素生体利用率の信頼性の高いinvitro評価のために

科学分野:

• 栄養科学
• invitro消化モデル
• 細胞生物学

背景:

• 栄養素のinvitro評価では、しばしば消化管消化モデルと腸管細胞システムが組み合わせて用いられます。
• INFOGESTのような静的消化プロトコルは、上皮バリアの完全性を損なう可能性があり、研究の再現性を制限します。
• 信頼性の高いinvitro試験のために消化液を調製するための標準化された方法が必要です。

研究 の 目的:

• 腸管上皮細胞の生存率とバリア機能を維持するための5つの消化液調製戦略を比較すること。
• 腸管細胞モデルに使用するためのINFOGEST消化液を調製するための最適な方法を特定すること。
• 生理学的に関連性のある濃度と再現可能な曝露条件を保証すること。

主な方法:

• 酸性化、遠心分離、急速凍結、および限外ろ過（10 kDaおよび3 kDa MWCO）の5つの消化液調製戦略の体系的な比較。
• ヨーグルト、ビスケット、およびサバ缶からのINFOGEST消化液の評価。
• Caco-2細胞の生存率（MTTアッセイ）およびバリア機能（TEER測定）の評価。

主要な成果:

• 3 kDa限外ろ過は、1:10希釈率ですべての食品マトリックスにおいて、一貫して上皮細胞の生存率とバリア機能を維持しました。
• 他の調製方法は、細胞生存率が許容範囲内であったにもかかわらず、トランエピセリアル電気抵抗（TEER）を維持できませんでした。
• 低希釈率では食品マトリックス効果が結果に影響を与え、マトリックス固有の評価が必要となりました。

結論:

• 3 kDa限外ろ過は、INFOGEST消化液と腸管細胞モデルとの適合性を向上させるための、効果的で侵襲性の低い戦略です。
• この方法は、上皮細胞の完全性を維持する再現可能な曝露条件を可能にします。
• この結果は、栄養科学におけるより信頼性の高いinvitro生体利用率評価と方法論の標準化を支持します。