ヒトiPS細胞から機能的なマクロファージへの分化のための、頑健でスケーラブルかつ異種細胞を含まないプロトコル

科学分野:

• 幹細胞生物学
• 免疫学
• 細胞療法

背景:

• ヒトiPS細胞（hiPSC）由来マクロファージ（iMac）は、自家細胞免疫療法において有望視されています。
• 効率的でスケーラブル、かつ医薬品製造管理および品質管理基準（GMP）に準拠した分化プロトコルの欠如が、臨床応用を妨げています。

研究 の 目的:

• 臨床グレードのhiPSCから機能的なiMacへの分化のための、頑健でスケーラブル、かつGMPに準拠したプロトコルの開発。
• 分化条件を最適化し、GMPへの迅速な応用を可能にすること。

主な方法:

• 胚様体（EB）形成による3D培養でhiPSCを中胚葉へと分化させました。
• EBから骨髄前駆細胞を誘導し、G-Rexプラットフォームを用いてM1またはM2 iMacへとさらに分化させました。
• 分化、純度、および機能をフローサイトメトリー、食作用アッセイ、ELISA、およびMay-Grünwald Giemsa染色を用いて評価しました。

主要な成果:

• 生存iMacの平均純度98%を達成しました。
• 単一のhiPSCから平均250倍の分化倍率を示しました。
• プロトコル全体を通して、フィーダー非存在下、スケーラブル、かつGMPに適用可能な試薬を使用しました。

結論:

• 開発されたプロトコルは、臨床グレードのhiPSCから機能的なiMacを効率的に製造します。
• このスケーラブルな方法はGMP製造に適しており、細胞免疫療法におけるiMacの進歩を促進します。