血漿細胞外小胞における表面およびカーゴタンパク質の測定法および短期間の日内変動

科学分野:

• 生化学;バイオテクノロジー;医療診断

背景:

• 細胞外小胞（EV）は疾患バイオマーカーとして有望である。;EV研究における技術的および生物学的変動性の特性評価は非常に重要である。;採血時間などの前処理要因は、EVバイオマーの信頼性に影響を与える可能性がある。

研究 の 目的:

• EV測定における測定法上および生物学的変動性を体系的に定量化する。;EVバイオマーに対する日内採血（午前対午後）の影響を評価する。;EV特性評価のためにEV-Array、ナノ粒子追跡分析（NTA）、および質量分析（LC-MS/MS）を評価する。

主な方法:

• 健康な成人6名から午前と午後に採取した血漿検体。;表面タンパク質に対するEV-Arrayを用いた分析。;EV分離後、粒子サイズと濃度を測定するためのNTA、およびプロテオームカーゴを測定するためのLC-MS/MS。

主要な成果:

• NTA（CV 3.3%）およびLC-MS（CV 8.2%）の高い測定法上の繰り返し精度、EV-Array（CV 22.6%）の低い繰り返し精度。;検体間変動（5-21%）は被験者間変動よりも低かった。;EVのサイズ、濃度、またはカーゴに有意な全身性の日内バイアスは観察されなかった。午後の検体では一部の表面マーカーがわずかに減少した。

結論:

• 健康な個人において、日内採血時間はEVバイオマーに大きな全身性バイアスをもたらさない。;堅牢なEVバイオマー研究には、個体差と測定法の標準化が不可欠である。;特定のEV表面マーカーに対する軽微な日内効果を確認するためには、さらなる研究が必要である。