血清抽出物中のリシプラム分析用クロマトグラフィー法の開発

科学分野:

• 分析化学; 薬理学

背景:

• 脊髄性筋萎縮症（SMA）の治療薬であるリシプラムについては、公開されている分析方法が限られています。既存のリシプラムおよびその代謝物の分析では、主にサンプル調製にタンパク質沈殿を用いたC18カラムが使用されています。

研究 の 目的:

• リシプラムの新規分析方法を開発および検証すること。様々なクロマトグラフィーカラムおよび移動相におけるリシプラムの保持を比較すること。

主な方法:

• 逆相超高速液体クロマトグラフィー（UHPLC）が採用されました。様々な移動相を用いて5つの異なるカラムが評価されました。サンプル調製のために10％トリフルオロ酢酸（TFA）を用いたタンパク質沈殿が最適化され、90％の回収率が達成されました。

主要な成果:

• リシプラムは、π-π相互作用によりフェニルカラム上で保持が強化されました。移動相のpHを上げるとリシプラムの保持が増加しましたが、塩濃度はほとんど影響しませんでした。アンモニウムホルメート（10 mM、pH 4）とアセトニトリルを使用したオクタデシルペンタフルオロフェニルカラムが選択され、良好な直線性、繰り返し性、および短い実行時間を示しました。

結論:

• リシプラムの抽出および測定のためのシンプル、迅速、かつ信頼性の高い方法が開発されました。この方法は、臨床現場における日常的なリシプラムモニタリングおよび品質管理に適しています。