高通量UHPLC-DMS-MS/MSメソッドの開発,大腸がんにおける関連するリンパ脂類の標的定量化
Miriam Wimmer1,2, Olivia I Coleman3, Adam Sorbie4
1TUM Graduate School, School of Life Sciences, Technical University of Munich, Alte Akademie 8, 85354 Freising, Germany.
新しい液体染色学-微分運動スペクトロメトリー-タンデム質量スペクトロメトリー (LC-DMS-MS/MS) メソッドにより,絶対的なフォスフォリピドの定量化が可能になりました. このテクニックは,マウスの大腸腫瘍における増加した脂質種を特定し,疾患に関連した脂質再構成の検出を支援しました.
科学分野:
- バイオケミストリー バイオケミストリー
- アナリティカル・ケミストリー (Analytical Chemistry) とは
- がん研究 がん研究
背景:
- フォスフォリピドは,細胞膜と細胞プロセスにとって極めて重要です.
- 現在の定量化方法は,しばしばLC-MSを用いた相対的な測定に依存しています.
- フォスフォリピドの正確な分析には,選択性の強化が必要である.
研究 の 目的:
- 絶対的なフォスフォリピド定量化のための標的型LC-DMS-MS/MSアッセイを開発し,検証する.
- 選択性を向上させ,フォスフォリピド分析における背景騒音を減らすために.
- 大腸がんにおける脂質変化を特定するための方法を適用する.
主な方法:
- 液体クロマトグラフィーを差分運動スペクトロメトリとタンデム質量スペクトロメトリ (LC-DMS-MS/MS) と結合する.
- 4つのクラスにわたる63種のフォスフォリピドの標的定量化.
- 定量化の回復と限界を含む,アッセイの性能の検証.
主要な成果:
- LC-DMS-MS/MSメソッドは,高い選択性と低い定量化限界 (組織1mgあたりng) を達成しました.
- マウスの大腸がん組織で47種のフォスフォリピドの絶対定量化が可能になった.
- 22種類のフォスフォリピドの有意な増加は,非腫瘍組織と比較して腫瘍組織で観察されました.
結論:
- LC-DMS-MS/MSは,絶対的なフォスフォリピド定量化のための堅牢なプラットフォームを提供します.
- この方法は,結腸癌で見られるように,疾患に関連した脂質リモデリングを効果的に検出します.
- フォスファディチルグリセロールとフォスファディチルエタノアミンを含む特定のフォスフォリピドのクラスは,腫瘍における重要な折り畳み変化を示しました.
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