液体クロマトグラフィとタンデム質量スペクトロメトリを組み合わせた液体クロマトグラフィを用いたプラズマと組織におけるPrC-210の新しい感受性誘導分析法
Bryan L Fahl1, Cameron O Scarlett2, William E Fahl1,3
1Obvia Pharmaceuticals Ltd., Madison, WI, USA.
反応性酸素種 (ROS) スキャベンジャーであるPrC-210は,放射線毒性,神経変性疾患,臓器損傷の予防に有望であることが示されています. 検証されたLC-MS/MSメソッドは,マウスの血および組織でPrC-210を定量化しています.
科学分野:
- 薬理学 薬理学とは
- アナリティカル・ケミストリー (Analytical Chemistry) とは
- バイオケミストリー バイオケミストリー
背景:
- PrC-210は,潜在的治療用途を持つ直接作用活性酸素種 (ROS) スキャベンジャーです.
- 臨床前モデルにおけるその有効性は,放射線毒性,神経変性疾患,イシュケミア-リパーフュージョン損傷などのROS誘発状態を予防できることを示唆しています.
研究 の 目的:
- PrC-210を定量化するための,敏感で特異的な液体染色体-タンデム質量スペクトロメトリ (LC-MS/MS) 方法を開発および検証.
- マウス・プラズマおよび組織ホモゲネートにおけるPrC-210濃度を測定するために,様々な投与経路に従った.
主な方法:
- PrC-210の自由スルフヒドリル群は,N-エチルマレイミド (NEM) と誘導され,安定したPrC-210-NEM結合体を形成しました.
- アシクロビールは,アセトニトリル/0.1%のカエル酸を用いたプラズマおよび組織ホモゲネートからの抽出のための内部標準として使用されました.
- 定量化は,陽性イオンモードのトリプル四極スペクトロメーターを使用して行われ,7.5 nMから5000 nMまで検証されました.
主要な成果:
- LC-MS/MSメソッドは,高い感度,特異性,および精度 (試験間および試験内精度<10%) を示した.
- PrC-210-NEMの定量化限界は2.5 nMでした.
- この方法は,経口,腹腔内,または皮下投与後に126匹以上のマウスでPrC-210濃度を測定することに成功した.
結論:
- 生物学的マトリックスにおけるPrC-210の定量化のために,強力なLC-MS/MSアッセイが確立されました.
- この方法により,PrC-210の in vivo の薬理学および分布の研究が可能です.
- 検証されたアッセイは,ROSに関連する疾患におけるPrC-210の治療の可能性のさらなる調査をサポートしています.
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