ヒト腎臓のチューブロイドのレンチウイルス工学およびマルチオーム特性に関するプロトコル

科学分野:

• ネフロロジーはネフロロジーを用います.
• がん生物学 がん生物学
• 幹細胞生物学 幹細胞生物学

背景:

• 正常なヒト組織から派生したオルガノイドは,貴重な臨床前モデルである.
• 腫瘍の進行を研究するには,効果的な疾患モデルが必要です.
• 腎臓オーガノイド (チューブロイド) は,腎臓疾患の研究に有望な道を提供している.

研究 の 目的:

• 腎臓オーガノイド (チューブロイド) を用いた疾患モデリングの詳細なプロトコルを提供すること.
• 実験用にチューブロイドを設置し,維持する.
• 遺伝子およびトランスクリプトミックプロファイリングを含むダウンストリーム分析を可能にする.

主な方法:

• 健康な組織から腎臓のチューブロイドの形成と通過.
• 遺伝子改変を導入するためのレンチウイルストランスデュークション.
• 組織学的分析,CUT&RUN,および単細胞RNA配列解析のためのチューブロイドの準備.

主要な成果:

• このプロトコルは,チューブロイド生成と操作のための包括的なワークフローを提供します.
• この方法は,特定の突然変異をモデル疾患に導入することを可能にします.
• チューブロイドは,高度な分子および細胞分析のために準備されています.

結論:

• このプロトコルは,堅固な臨床前疾患モデリングのために腎臓オルガノイドの使用を容易にする.
• チューブロイドは,腎臓腫瘍の進行と遺伝的変化を調査するための強力なツールとして機能します.
• 記述された技術は,人工腎臓オルガノイドの包括的な分子プロファイリングをサポートします.