周辺血液単核細胞の表面染色により,従来のおよび非従来のT細胞集団の免疫フェノタイプ化
Andrea Leufgen1, Annika Steitz1, Conrad Rauber2
1Clinical Cooperation Unit Applied Tumor Immunity, German Cancer Research Center (DKFZ), Heidelberg, Germany; National Center for Tumor Diseases (NCT) Heidelberg, A partnership between DKFZ and Heidelberg University Medical Center, Heidelberg, Germany.
この研究では,先端の28色のフローサイトメトリを使用して,ヒトの周辺血液単核細胞 (PBMC) を分離,保存,分析するための堅牢なプロトコルについて詳細に述べています. この方法は,様々な臨床研究アプリケーションの免疫モニタリングを強化します.
科学分野:
- 免疫学 免疫学とは
- 細胞生物学 細胞生物学
- バイオテクノロジー バイオテクノロジー
背景:
- ヒト外周血液単核細胞 (PBMC) の正確な免疫フェノタイプ化は,トランスレーションおよび臨床免疫学にとって極めて重要です.
- 既存のプロトコルには,冷凍保存と高次元分析の標準化が欠如し,縦線または多センター研究が制限されている可能性があります.
研究 の 目的:
- PBMCの隔離,冷凍保存,28色フローサイトメトリの免疫フェノタイプ化のための包括的で再現可能なプロトコルを提示する.
- 多様なT細胞集団とその機能的状態の同時評価を可能にする.
主な方法:
- 血液処理の詳細な手順,密度グラデーション分離,血小板汚染を減らすために最適化された洗浄.
- 細胞の生存能力と機能を維持するための標準化された冷凍保存技術.
- PBMC染色に最適化された28色のフローサイトメトリーパネル,従来のスペクトルシステムと互換性があります.
主要な成果:
- このプロトコルは,リンパ球集団,特にTリンパ球の堅牢で再現可能な識別を可能にします.
- 健康なドナーおよび患者からの新鮮なおよび冷凍保存されたPBMCの両方に有効です.
- 感染症,がん,免疫療法における免疫モニタリングに適用できることを示しています.
結論:
- このプロトコルは,PBMCsの高次元免疫プロファイリングのための信頼できる枠組みを提供します.
- ワークフローは適応可能で,標準化された免疫モニタリングパイプラインに統合できます.
- 異なる研究環境と患者コホートにおける一貫した免疫細胞分析を容易にする.
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