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Updated: Feb 17, 2026

A GMP-Compliant Procedure for the Generation of Gene-Modified T cells
Published on: October 6, 2023
T細胞由来誘発性多能幹細胞のGMP準拠の実用的な製造プロセスの開発
Ruud Hulspas1, Carolina Sasso2, Amy Cunningham2
1Connell & O'Reilly Families Cell Manipulation Core Facility, Dana-Farber Cancer Institute, Smith Research Building, Boston, Massachusetts, USA; Harvard Medical School, Boston, Massachusetts, USA.
この研究では,T細胞から自主誘導多能幹細胞 (iPSC) を生成するためのGMP適合のワークフローを詳細に説明し,トランスレーション用アプリケーションに最適化された製造で臨床的に実行可能な13のiPSCラインを生成します.
科学分野:
- 幹細胞生物学 幹細胞生物学
- 細胞の再プログラミング
- 良質な製造慣行 (GMP) について
背景:
- 自動誘発型多能幹細胞 (iPSCs) は再生医療にとって有望である.
- GMPに適合する製造ワークフローを確立することは,臨床翻訳において極めて重要です.
- 周辺血液単核細胞 (PBMC) の再プログラミングは,iPSCの生成のための有効な源を提供します.
研究 の 目的:
- T細胞から自律的なiPSCを生成するためのGMPに適合する製造ワークフローを開発し,検証する.
- 生成されたiPSCの品質,アイデンティティ,ゲノム整合性を評価する.
- 臨床環境で効率と再現性を高めるためのワークフローを最適化します.
主な方法:
- GMPグレードの仙台ウイルスベクトルを用いて,T細胞に富んだPBMCを再プログラムする.
- プラリポテンシーマーカー (Oct-4, TRA-1-60, SSEA-1) のためのiPSCコロニーの特徴付け.
- T細胞受容体 (TCR) β鎖遺伝子再構成分析によるT細胞起源の確認.
- 細胞遺伝分析 (G帯カリオタイプ化) と,ゲノム整合性のための標的配列決定 (OncoPanelアッセイ).
- ワークフローの最適化のためのプロセスの一時停止の実装.
主要な成果:
- 高プラリポテンツマーカーの発現を持つ20個のiPSCコロニーの生成.
- 18/20のiPSCラインで14の独特のクローン的に独特なラインでT細胞の起源を確認しました.
- ドナーT細胞にも存在するT細胞由来iPSCにおける再発性PRSS1遺伝子欠損の特定.
- すべての品質管理および放出基準を満たした13のユニークなT細胞由来iPSCラインが得られました.
- 業務効率の向上のために,ワークフローの最適化戦略を実証した.
結論:
- オトログのT細胞由来 iPSC 生成のための実用的なGMP対応のワークフローが成功裏に確立されました.
- 生成されたiPSCラインは,下流の臨床およびトランスレーションアプリケーションに適しています.
- ワークフローの最適化により,臨床環境でのiPSC製造の実現性と再現性が向上します.
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