CIMmultus^®のQA HRラインで再現可能なAAV濃縮のための最適化とスケールアップ戦略をステップアップします

科学分野:

• バイオテクノロジー バイオテクノロジー
• 遺伝子療法の遺伝子治療法
• クロマトグラフィークロマトグラフィー

背景:

• アデノ関連ウイルス (AAV) 遺伝子療法の製造は,空,満,中間カプシドを分離する課題に直面しています.
• AAVの浄化のためのダウンストリーム処理のスケーリングアップは大きな障害です.

研究 の 目的:

• 効率的なAAVカプシド分離と浄化のためのモノリシッククロマトグラフィーを評価する.
• 大規模なAAV生産のためのモノリシッククロマトグラフィのスケーラビリティを実証する.

主な方法:

• AAVカプシド浄化のためのCIMmultus® HRとQA HRの単体柱を使用しました.
• 高通量スクリーニング (HTS) と単列実験を使用した.
• バインド・エリュート・モードとフロー・スルー・モードでのステップエリューション方法の開発と最適化.

主要な成果:

• AAV2/8カプシドを分離する際に高い再現性を達成した (±3%の空カプシドの同導性エリューション).
• 全AAVカプシドを88%±9%に濃縮し,77%±3%のゲノム回復を実現しました.
• 最適化されたAAVの磨き方法を1から8000mLのモノリットをスケールすることに成功しました.

結論:

• モノリシッククロマトグラフィは,スケーラブルなAAV浄化のための高流量と解像度を提供します.
• 開発されたステップエリューション方法では,AAVキャプシドの完全な回収と純度が比較できます.
• この最適化された方法は,効率的な大規模なAAV遺伝子療法製造を容易にする.