牛の新型コロナウイルスを検出するための,敏感で幅広いスペクトルのリアルタイムリバーストランスクリプション定量PCRアッセイ

科学分野:

• 獣医ウイルス学 獣医ウイルス学
• 分子診断は分子診断です.
• 動物保健 動物保健

背景:

• 牛の新型コロナウイルス (BCoV) は,呼吸器系および腸内感染症により,牛に重大な経済的損失をもたらします.
• BCoVの既存の診断方法は,新興株に必要な感受性が欠けている.
• BCoVの進化を監視するために,高度な診断ツールが不可欠です.

研究 の 目的:

• BCoVの検出のために,非常に敏感で幅広いスペクトルのRT-qPCRアッセイを開発する.
• 検査が継続的に新興する新規のBCoV菌株を特定できるようにするためです.
• 獣医学アプリケーションのための信頼性の高い診断ツールを提供するために.

主な方法:

• BCoV M遺伝子を標的としたプライマー・プローブ・セットの最適化と比較.
• トランスクリプトされたRNAとBCoVcDNAを用いた感度,再現性,再現性のテスト.
• 他の4種類の牛のウイルスに対する特異性評価.
• 基準法と比較した46のフィールドサンプルでの診断性能分析.

主要な成果:

• BCoVに対する敏感で幅広いスペクトルのRT-qPCR検査が成功裏に開発されました.
• 分析感度は10コピー/μLに達し,新興の中国BCoV単離体の性能が向上しました.
• 高度な再現性が確認され,試験内および試験間での低変数係数 (CV) が確認されました.
• 開発されたアッセイは,プライマー/プローブ配列の違いによる基準法と比較して優れた診断感度を示した.

結論:

• 新型および新興株を含むBCoV検出のための非常に敏感で幅広いスペクトルのRT-qPCRアッセイが確立されています.
• このアッセイは,現在のBCoVフィールド株と最近の変種に対する改善された診断能力を提供します.
• 開発されたRT-qPCRアッセイは,反動物におけるBCoVの監視と制御のための貴重なツールです.