脂質の膨張顕微鏡 (ExM) は,膜の超解像度イメージングのために使用されます

科学分野:

• 細胞生物学 細胞生物学
• 顕微鏡による顕微鏡検査
• バイオケミストリー バイオケミストリー

背景:

• 細胞膜は,細胞機能にとって極めて重要です.
• 膜の超構造を視覚化するには超解像度顕微鏡が必要である.
• 現在の技術は,脂質の可視化に限界があります.

研究 の 目的:

• 脂質膨張顕微鏡 (LExM) の包括的なプロトコルを提示する.
• 細胞膜のナノスケール可視化を可能にする.
• 膜超構造の超解像度イメージングを達成するために.

主な方法:

• 細胞膜にフォスフォリピド前駆体やコレステロール類の物質を表示する.
• 脂質をアルキン機能群でバイオオートホーゴン的にラベリングする.
• 三機能探査機を用いたクリック化学 (CuAAC) によるヒドロゲルへの共振性アンカリング.
• ハイドロゲルの物理的な膨張とイメージング.

主要な成果:

• LExMは,細胞膜のナノスケール可視化を可能にします.
• サブdiffraction解像度のための 4-7.8x サンプル拡張を達成しました.
• 標準コンフォカル光顕微鏡と互換性がある.
• タンパク質-脂質コロカライゼーションのマルチプレックス画像に適応できます.

結論:

• LExMは,膜超構造の超解像度イメージングのための堅牢な方法を提供します.
• このプロトコルは,脂質組織の詳細な可視化を促進します.
• LExMは,細胞生物学の研究のための汎用的な技術です.