スキャン電子顕微鏡を用いたアプローチで,マウスとヒトの糖尿病性腎臓におけるサブポドサイト空間再構成を調査する

科学分野:

• ネフロロジーは腎臓科
• 電子顕微鏡による電子顕微鏡
• 糖尿病性腎臓病の研究

背景:

• サブポドサイト空間 (SPS) の膨張は,糖尿病性腎不全における球機能障害の初期指標である.
• SPS分析のための伝統的な伝送電子顕微鏡 (TEM) は, perfused 組織を必要とします.
• 以前のスキャニング電子顕微鏡 (SEM) プロトコルは有効でしたが, perfusion 固定に依存していました.

研究 の 目的:

• 非浸透した腎臓サンプルにおけるSPS分析のための迅速なSEMプロトコルを開発する.
• 新SEMプロトコルの正確性を臨床前モデルとヒトバイオプシーで検証する.
• 臨床的に重要な環境における信頼性の高いSPS超構造分析を可能にする.

主な方法:

• 非貫通されたサンプルの二次電子検出を用いた急速なSEMプロトコルを開発しました.
• 健康なマウスと糖尿病マウスの perfusedとnon-perfused腎臓のSEM分析を比較した.
• コントロール群と糖尿病患者のヒト腎臓生検にプロトコルを適用しました.

主要な成果:

• 急速なSEMプロトコルでは,SPSの形状と定量的測定を,未 perfusedマウスの腎臓で正確に評価しました.
• この方法は, perfusedとnon-perfusedのサンプル間で一貫した結果を示しました.
• ヒトの生検に成功した応用により,全球膜の横断面全体で信頼性の高いSPS評価が可能になりました.

結論:

• 最適化されたSEMプロトコルは,非貫通型臨床前モデルのSPS分析のための信頼性と多用途のツールです.
• このアプローチは,SPSの超構造的分析を,人体腎臓生検に拡張し, perfusion に服従していないものを含む.
• このプロトコルは,糖尿病性腎不全におけるポドサイト損傷の研究を臨床的な文脈で強化します.