CHO細胞における三特異性T細胞エンゲージャーの改良発現のための細胞株開発ベクター戦略

科学分野:

• バイオテクノロジー
• 分子生物学
• バイオ医薬品製造

背景:

• 三特異性抗体（trisAbs）は治療上の可能性を示しているが、生産上の課題に直面している。
• 複雑なtrisAbの効率的な細胞株開発は、複雑な鎖のペアリングの必要性によって妨げられている。
• trisAb生産における高収量と品質の達成には、最適化された発現システムが必要である。

研究 の 目的:

• 複雑な三特異性抗体T細胞エンゲージャー（TriMab）を生産するための異なる発現ベクター構成を評価すること。
• TriMabsの堅牢で高レベルな発現と製造性の向上に最適なベクター戦略を特定すること。
• 次世代trisAb生産のための遺伝子ベクター設計のフレームワークを提供すること。

主な方法:

• 安定なチャイニーズハムスター卵巣細胞で3つの異なる発現ベクター構成をテストした。
• プール性能、トランスフェクション回収率、生産物力価、および生産物品質バリアントを評価した。
• ベクター設計と生産性の相関を調べるために、遺伝子コピー数とmRNAレベルを分析した。

主要な成果:

• 従来の二重重鎖（HC）および三重軽鎖（LC）ベクターは、低い力価と遅延した回収率という低い性能を示した。
• HC遺伝子の順序を逆にし、LCを分散させた再設計戦略は、トランスフェクション回収率と生産物力価を改善した。
• 最適化されたクローナル細胞株は、望ましい製品品質プロファイルで2 g/Lを超える力価を達成した。

結論:

• ベクター構成は、複雑な三特異性抗体（TriMabs）の製造性に重大な影響を与える。
• HC遺伝子の順序を逆にし、別々のベクターにLCを分散させることは、TriMab生産効率を向上させる。
• 本研究は、trisAb製造における合理的な遺伝子ベクター設計のための実践的なアプローチを提供する。