溶解した細胞からの核の非水性介質での大量分離

科学分野:

• 細胞生物学 細胞生物学
• バイオケミストリー バイオケミストリー
• 分子生物学は分子生物学である.

背景:

• 無傷な核を隔離することは,分子生物学と生化学の様々な下流応用において極めて重要です.
• 伝統的な方法は,不安定で水溶性核成分の分解につながり,実験結果に影響を与える可能性があります.

研究 の 目的:

• 多様な組織源から無傷の冷凍核を入手するための信頼性の高い方法を開発する.
• 隔離プロセス中に不安定で水溶性核成分の整合性を保ちます.

主な方法:

• 細胞核は, -156°Cで凍結し, -25°Cで乾燥し,2°Cでグリセロールに機械的に解離することによって,組織から得られた.
• 原子核の離心分離は,2°Cのグリセロールと3-クロロ-1,2-プロパンジオール 85:15 (v/v) の混合物を用いて行われた.

主要な成果:

• 記述された方法は,様々な組織から無傷で溶解した核を成功裏に生成しました.
• 均質な核製剤は,高収量で得られた.
• 不安定で水に溶ける核成分は,プロセスを通して保存された.

結論:

• この方法は,高品質の,無傷の冷凍核を準備するための堅固なアプローチを提供します.
• 保存された核成分は,細胞生物学および関連分野における信頼性の高い下流分析を容易にする.
• この技術は,インシット (in situ) と培養組織の両方に適用できます.