2つの非毒性交叉反応変異タンパク質からディフテリア毒素の復元

科学分野:

• 微生物学 微生物学とは
• 分子生物学は分子生物学である.
• バイオケミストリー バイオケミストリー

背景:

• ディフテリア毒素は,Corynebacterium diphtheriae.によって生成される強力な細菌外毒素です.
• 毒素の活動は,その酵素性A亜単位によって媒介され,ADP-ribosylates延長因子2である.
• 毒素合成に影響を与える変異体は,毒素の構造と機能の関係を理解するために重要である.

研究 の 目的:

• 新型変異体のコリーネファージββの孤立を記述する.
• 非毒性のディフテリア毒素変異タンパク質 (crm197) を特徴付ける.
• 非有毒な成分から活性ディフテリア毒素を再構成する可能性を調査する.

主な方法:

• ミスセンスの変異体であるコリーネファージβの分離と特徴付け.
• リゾーゲン菌株から非毒性細胞外タンパク質 (crm197) の生産と精製.
• HeLa細胞におけるディフテリア毒素の抑制を評価するためのインビトロアッセイ.
• 変異した毒素の断片の酵素活性測定.
• 2つの非毒性変異タンパク質 (crm45とcrm197) から活性なディフテリア毒素の復元.

主要な成果:

• 変異したCorynephage beta (β197) が分離され,ディフテリア毒素構造遺伝子のミッセンセスの変異を運びました.
• 溶解性菌株C7(8)(beta(197))(毒性-crm+) は62,000MWの非毒性細胞外タンパク質 (crm197) を生成した.
• crm197タンパク質は,HeLa細胞におけるディフテリア毒素の活性を抑制し,細胞表面受容体との競争を示唆した.
• crm197断片A (A(197)) は,真核多ペプチジル転送RNA-トランスフェラーゼIIに対する酵素活性が欠如していた.
• 活性ディフテリア毒素は,crm45およびcrm197タンパク質の混合物の軽度のトリプシン処理によって高収量で再構成されました.

結論:

• この研究では,新しい突然変異のCorynephage betaとその関連する非毒性のディフテリア毒素タンパク質,crm197.7について説明しています.
• crm197タンパク質は毒素阻害剤として作用し,おそらく細胞結合を阻害する.
• 毒性のない断片から活性なディフテリア毒素の復元は,毒素の組立と機能を研究する可能性を示している.