ラリアト構造は,酵母前mRNAのスプライシングにおけるインビボ中間物質である

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• イースト遺伝学 イースト遺伝学
• RNA スプライシング

背景:

• イーストのアクチン遺伝子は,遺伝子発現に不可欠なイントロンを含んでいます.
• ADC1-アクチン遺伝子融合からアクチンイントロンの効率的なインビボスプライシングが観察されています.
• イントロンの処理と構造を理解することは,遺伝子調節の研究にとって不可欠です.

研究 の 目的:

• イーストの切断されたアクチン・イントロンの形と構造を特徴付ける.
• 内部処理における保存されたUACUAAC (TACTAACボックス) 配列の役割を調査する.
• 切断されたイントロンRNA内の特定の化学結合を決定する.

主な方法:

• 酵母からのポリア) -とポリア) +RNA分子の分析.
• ポリアクリルアミドゲル電泳により,RNAのサイズと可動性を評価する.
• リバーストランスクリプションアッセイは,RNA処理におけるブロックを特定するために行われます.
• In vivo 32Pラベル付けと切断されたイントロンRNA構造の分析.

主要な成果:

• 切断されたアクチンイントロンRNAの4つの異なる形態が特定されました.
• 2つの切除されたイントロンの形態は,ゲルに異常な移動を示した.
• 保存されたUACUAAC配列 (TACTAACボックス) は,いくつかの種で逆転写酵素ブロックを示した.
• 主要な切除されたイントロンの種は,2'-5'フォスフォディエステル結合を持つラリアトRNAとして特定されました.

結論:

• イーストはアクチンイントロンを in vivo で効率的に処理し,消去します.
• 切断されたアクチン・イントロンは,安定したラリアート構造を形成することができる.
• TACTAACボックスはスプライシングメカニズムに関与し,特定のRNA構造につながる可能性があります.