エイズ関連レトロウイルスの分子クローニング

科学分野:

• ウイルス学 ウイルス学 ウイルス学
• 分子生物学は分子生物学である.
• 免疫学 免疫学とは

背景:

• レトロウイルスは,様々な鳥類や哺乳類の病気に関与しています.
• ヒト獲得免疫不全症候群 (AIDS) は,免疫機能の崩壊と機会性感染症によって特徴付けられています.
• リムファデノパシー関連ウイルス (LAV),ヒトT細胞リンパ性ウイルス (HTLV-III),エイズ関連レトロウイルス (ARV-2) を含むレトロウイルスは,エイズと関連しています.

研究 の 目的:

• エイズ関連レトロウイルス (ARV-2) のゲノムを特徴づける.
• 感染したヒトT細胞系におけるARV-2の分子形態を調査する.

主な方法:

• 感染した細胞培養媒介からバイリオンを浄化する.
• ゲルエレクトロフォレシスによるウイルスRNAゲノムサイズ識別.
• ウイルスRNAから補完的なDNA (cDNA) 探査機の合成.
• cDNAプローブを使用して,感染した細胞におけるウイルスDNA形態 (円形およびプロバイラル) の検出.
• 感染した細胞からDNAライブラリを構築する.
• プロバイラル挿入を含む再結合ファグDNAの分析.
• ARV単離を比較するために制限エンドヌクレアース消化.

主要な成果:

• 約9キロベース (kb) のウイルスのRNAゲノムがARV-2ウイルスで特定されました.
• cDNAプローブは,感染した細胞の中で円形のDNA分子とプロバイラル形態を検出しました.
• 再結合ファグには9.5kbのプロウイルスDNAが含まれており,その一部はEcoRIサイトと比較して変異したウイルスDNAを示していた.
• 制限部位ポリモルフィズムは,異なるエイズ患者の3つのARV単離体の中で観察されました.

結論:

• この研究では,ARV-2のRNAゲノムを成功裏に特定し,特徴づけました.
• 感染した細胞におけるARV-2の循環型およびプロウイルス性DNA形態の証拠が提供されました.
• ARV単離体間の遺伝的多様性が実証され,ウイルスの進化の可能性を示唆しました.