酵母アルコール脱水素酶IIの構成的発現に関連した転置可能な要素

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• イースト遺伝学 イースト遺伝学
• 酵素規制法について

背景:

• イーストのADR2遺伝子は,グルコース抑制性アルコール脱水素酶II (ADHII) をコードする.
• ADHIIの調節を理解することは,酵母における遺伝子発現を研究するために極めて重要です.
• 構成的な突然変異は,正常な代謝経路を変化させる可能性があります.

研究 の 目的:

• 酵母ADR2遺伝子におけるシス支配的構成変異の遺伝的基礎を調査する.
• ADHIIに対するグルコース抑制の喪失につながる分子メカニズムを特定する.
• ADR2遺伝子発現に影響を与える突然変異の性質を特徴付けるために.

主な方法:

• 変形酵母における補足による遺伝子分離.
• 変異酵母菌株の染色体DNAの制限酵素分析.
• クローンされたADR2DNAを用いたハイブリッド化探査.
• 構成型変異体からのADR2遺伝子断片のクローニング.
• ヘテロデュプレックス分析とサザンブラッティング.

主要な成果:

• 構成的なADR2変異体9種のうち7種は,コーディング領域の5'端の近くに挿入を示した.
• 4つの挿入はTy1の転置可能な要素パターンと一致し,他の挿入は変異を示した.
• すべての挿入はADR2遺伝子の相対的な同じ指向でした.
• 複製された挿入配列は,中程度に重複するDNAを含み,複数のゲノムサイトにハイブリッド化しました.
• 転置可能な要素の挿入が構成的なADHII発現の原因として特定されました.

結論:

• ADR2遺伝子の5'末端付近に移植可能な要素を挿入すると,ADHIIの構成的発現につながる.
• この挿入メカニズムは,ADHIIに影響するcis-dominant構成変異の最も一般的な原因です.
• 移植可能な元素は,遺伝子発現を調節し,酵母における突然変異を生成する上で重要な役割を果たします.