ウサギのベータ・グロービン遺伝子の転写に必要なDNA配列を in vivo で検出する

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• 遺伝学 遺伝学とは
• 遺伝子発現分析 遺伝子発現分析

背景:

• ウサギのβ-グロービン遺伝子は,真核生物の遺伝子調節を研究するためのモデルとして機能しています.
• 調節性DNA配列を理解することは,遺伝子発現の制御に不可欠です.

研究 の 目的:

• ウサギのβ-グロービン遺伝子のインビボ発現に不可欠な特定のDNA配列を特定し,特徴づけること.
• 遺伝子転写におけるATAボックスと上流の規制領域の役割を明らかにする.

主な方法:

• ウサギのβ-グロービン遺伝子の様々な削除変異体の構築.
• シミアンウイルス40-プラズミド再結合を用いて,突然変異した遺伝子をHeLa細胞に変異させる.
• ベータ・グロービンのトランスクリプトレベルとトランスクリプション開始部位の特異性の分析.

主要な成果:

• 効率的な転写には,ATA (またはゴールドバーグ-ホーグネス) ボックスと,転写開始部位から100〜58塩基対上流に位置するDNA領域の両方が必要です.
• ATAボックスまたは上流領域の削除は,ベータ・グロービンのトランスクリプトレベルを (大きさの順序で) 大幅に低下させます.
• ATAボックスの削除は,RNA合成開始の特異性にも影響を及ぼします.

結論:

• ATAボックスと特定の上流DNA領域は,ウサギのβ-グロービン遺伝子トランスクリプション in vivoにおける重要なシス作用要素である.
• mRNAキャップサイトを含むATAボックスの下流のDNA配列は,このシステムでの転写開始に不可欠ではありません.