SV40複製の起源を網羅する断片は,ウイルスの切除のために cis で必要な唯一のDNA配列です

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• ウイルス学 ウイルス学 ウイルス学
• 遺伝学 遺伝学とは

背景:

• SV40の複製の起源は,ウイルスのDNA複製に極めて重要です.
• 遺伝子転送と真核細胞からの回復は,技術的な課題を提示します.

研究 の 目的:

• 切除と複製に必要な最小のSV40DNA配列を調査する.
• ユカリオット細胞からクローン遺伝子を救う方法を確立する.

主な方法:

• SV40の起源とチキンのチミジンキナーゼ遺伝子を持つ再結合プラズミドを構成する.
• プラズミドをTK欠乏細胞に変異させ,TK+コロニーを選択する.
• ヒトの細胞系をSV40T抗原を産生する類人猿の細胞に融合させた.
• エシェリキア・コライで切断されたプラズミドを救う.

主要な成果:

• SV40起源を含む311-bp断片は,効率的なプラズミド切除と高複製複製を媒介しました.
• 切除と複製は,SV40 T抗原を発現する許容性細胞との融合に依存していた.
• 入力DNAと同一の切除されたプラズミッドは,E. coli.で成功裏に救出されました.

結論:

• 特定されたSV40DNAセグメントは,cis.における切除と複製を媒介するのに十分である.
• このシステムは,真核生物ゲノムからクローンされた遺伝子を回復するための新しく効率的な方法を提供します.
• SV40媒介による遺伝子回復は,分子クローンと遺伝子工学における潜在的な応用がある.