L細胞に発現する細胞表面抗原は,発現する細胞と発現しない細胞の全DNAを移植したL細胞に発現する
Nature
|November 1, 1984
まとめ
研究者らは,DNAトランスフェクションを用いて細胞表面分子を移転する方法を開発した. このテクニックは,受容細胞で研究された21の分子のうち19を成功裏に発現させ,広範な適用性を実証しました.
科学分野:
- 免疫学 免疫学とは
- 分子生物学は分子生物学である.
- 遺伝学 遺伝学とは
背景:
- 以前の研究で,マウスのL細胞と,分化抗原を発現するヒトT細胞系からのDNAの安定したトランスフェクションが実証されました.
- これらの抗原の同一性は,免疫プレシピテーションとSDS-ポリアクリラミドゲル電泳を用いて確認されました.
研究 の 目的:
- 様々な細胞表面分子を発現する安定したトランスフェクタントを生成するための精製された共伝染プロセスを報告する.
- 異なった細胞タイプと抗原発現におけるトランスフェクション法の効率性と適用性を評価する.
主な方法:
- マウスのL細胞とチキンチミジンキナーゼ遺伝子 (tk) と細胞全体のDNAの共感染.
- ヒポキサンチン-アミノプテリン-チミジン (HAT) 媒介を用いた変容剤の選択.
- 発現細胞の識別と選択は,色結合モノクローナル抗体と光活性化細胞分類 (FACS) により行われます.
主要な成果:
- この手順により,様々な細胞表面分子を発現するトランスフェクタントが得られ,調査した21個の分子のうち19個がうまく移転した.
- 発現頻度は,ティミジンキナーゼ陽性 (Tk+) トランスフォーマー10^3分の1程度でした.
- 重要なのは,12個の分子のうち9つが,元々抗原を発現しなかった細胞からのDNAを使用して同じように表現されたことです.
結論:
- 記述された共伝染とFACS選択方法は,多様な細胞表面分子を発現する安定したトランスフェクタントを生成するのに効率的です.
- このメソッドの有効性は,ドナー細胞における元の発現状態に関係なく,分子の成功移転と発現によって実証されています.
- このテクニックは,細胞表面分子機能と分布を研究するための汎用的なツールを提供します.
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