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レプリタゼ多酵素複合体におけるアロステル相互作用に対する阻害剤の証拠

G P veer Reddy, A B Pardee

    Nature
    |July 7, 1983
    PubMed
    まとめ

    研究者らは,thymidylate synthaseがハムスター細胞の他のDNA生物合成酵素と機能的に結びついていることを発見しました. DNA合成酵素を標的とする阻害剤は,無傷の細胞内のチミジラート合成酵素の活性に影響し,複雑な相互作用を示唆する.

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    科学分野:

    • 分子生物学は分子生物学である.
    • 細胞生物学 細胞生物学
    • バイオケミストリー バイオケミストリー

    背景:

    • 以前,S相の中国ハムスターの胚繊維芽細胞 (CHEF/18細胞) から,DNA生物合成のための酵素を含む核分子を ("レプリタゼ") 特定しました.
    • このレプリターゼ分子は,約25nmの球形粒子を含んでおり,デノボDNA合成のためのマルチ酵素複合体を示唆しています.

    研究 の 目的:

    • DNA合成複合体内の他の酵素とのチミジラート合成酵素の機能的関連性を調査する.
    • 特定の酵素阻害剤が,無傷の細胞におけるチミジラート合成酵素の活性に対する影響を,溶解可能な抽出物との比較で調べる.

    主な方法:

    • 使用された特定の阻害剤:ヒドロキシ尿素 (リボヌクレオチド還元酵素),ノボビオシン (トポイソメラーゼ),アフィジコリン (DNAポリメラーゼα).
    • 無傷のS相CHEF/18細胞におけるチミジラート合成酵素の活性抑制を評価した.
    • 同じ阻害条件下で溶解性の細胞抽出物におけるチミジラート合成酵素の活性と比較.

    主要な成果:

    • ヒドロキシ尿素,ノボビオシン,アフィジコリンは,無傷のCHEF/18細胞におけるチミジラート合成酵素の活性を抑制した.
    • これらの阻害剤は,溶解性の細胞抽出物におけるチミジラート合成酵素の活性に影響を及ぼさなかった.
    • ティミジラート合成酵素と他のDNA生物合成酵素の機能的関連が実証されています.

    結論:

    • 結果は,多酵素DNA合成複合体のサブユニット間のアロステル相互作用を示唆しています.
    • これらの相互作用は,完ぺきな細胞内の特定の酵素阻害剤によって調節されます.
    • DNA複製のための調整された多酵素複合体のモデルをサポートします.