ドロソフィラヒストンH3 mRNAの3'端は, in vitro の処理活動によって生成されます

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• 遺伝子発現の規制について
• RNA 処理 RNA 処理

背景:

• ヒストンH3mRNAは,ドロソフィラのDNA包装と調節に不可欠です.
• mRNAの正確な3'-エンド形成は,トランスクリプトの安定性と翻訳に不可欠です.
• mRNA処理メカニズムの理解は,遺伝子調節に関する洞察を提供します.

研究 の 目的:

• ドロソフィラヒストンH3 mRNAの3'-エンド形成のインビトロメカニズムを調査する.
• 成熟したH3mRNAを生成する処理活動を特定し,特徴づけること.

主な方法:

• ドロソフィラヒストンH3とオリゴDCの尾をコードするDNAテンプレートを用いてin vitroトランスクリプション.
• イオン交換クロマトグラフィーとサクラロースグラデント沈殿によるRNA処理活動の特定と部分浄化.
• 処理活動の生化学的特徴,コファクターの要件および分子量の推定を含む.

主要な成果:

• ドロソフィラRNAポリメラーゼIIによる転写は,ヒストンH3遺伝子の自然な3'端を超えて進行した.
• 先駆者のトランスクリプトを割って成熟したH3mRNAを生成する特定の処理活動が特定されました.
• この活性にはMg++イオンが必要であり,核酸三リン酸から独立して機能する.
• 処理活動は,約14万ダルトンの推定分子量を持っています.

結論:

• 独特のRNA処理活動は,ドロソフィラヒストンH3 mRNAの3'端成熟に責任があります.
• この活動は, in vitro の転写プロセスとは独立して研究し,特徴づけることができます.
• この発見は,エウカリオトのmRNA3'エンド形成の複雑なメカニズムを理解するのに寄与する.