主要なダロソフィラ熱ショック遺伝子の活性化 in vitro

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• 遺伝学 遺伝学とは
• 発達生物学 発達生物学とは

背景:

• 不活性なドロソフィラの熱ショック遺伝子は,転写的に活性化することができます.
• この活性化プロセスには,熱ショックを受けた細胞からの細胞プラズマ的要因が関与しています.

研究 の 目的:

• ドロソフィラの熱ショック遺伝子の活性化に伴う分子機構を調査する.
• 熱ショック遺伝子の転写活性を誘発する要因を特定し,特徴づけること.

主な方法:

• ドロソフィラから二倍性核を分離した.
• 熱ショックを受けた細胞と熱ショックを受けていない細胞からのサイトプラズマ抽出物で核のインキュベーション.
• 活性因子の部分浄化と特徴付け.
• E. coli RNAポリメラーゼを用いたインビトロ転写アッセイ.
• 顕微鏡と生化学的方法を使用してクロマチンの変化の分析.
• ヒストンH1の枯渇実験.

主要な成果:

• 熱ショックを受けたドロソフィラのサイトプラズミック抽出物は,隔離された核で熱ショック遺伝子 (87Aと87Cロシ) の転写を誘導した.
• ヒストン遺伝子転写に効果は認められなかった.
• 活性化因子は,プロテアゼに敏感で,熱に不安定である.
• in vitro活性化時に構造遺伝子の5'-ディスタルで重要なクロマチンの変化が発生しました.
• このクロマチンの変化と遺伝子の活性化は,内生的なRNAポリメラーゼII活性とは独立して発生した.
• ヒストンH1減少後の活性化も観察されました.

結論:

• 熱誘導性サイトプラズマ因子は,熱ショック遺伝子の活性化を開始する上で重要な役割を果たします.
• 観察されたクロマチンの変化は,RNAポリメラーゼIIの募集に先立ち,遺伝子の活性化における早期のイベントを表す可能性があります.
• ヒストンH1は,熱ショック遺伝子の活性化のこの初期段階には不可欠ではありません.