CEM-C7ヒトリンパ球細胞のステロイド耐性変異体の"活性化不活性"グルココルチコイド受容体複合体

科学分野:

• 分子内分泌学分子内分泌学
• 細胞生物学 細胞生物学
• がん研究 がん研究

背景:

• グルココルチコイド受容体複合体は,核に入り,核に蓄積するために,温度に依存する"活性化"段階を経なければなりません.
• アクティベーションは,イオン強度,希釈,またはゲルフィルタレーションを増加させることでインビトロで達成され,DNAに対するステロイド受容体複合体の親和性を高め,イオン交換エリューションプロファイルを変更します.
• 以前の研究では,チモサイトからの活性化複合体が,インビトロ活性化複合体と同等に流出することを示しました.

研究 の 目的:

• ヒト白血病T細胞系におけるグルココルチコイド耐性の分子基礎を調査する.
• 敏感細胞系およびその抵抗性サブクローンのステロイド受容体複合体の活性化特性を特徴付ける.
• グルココルチコイド受容体の作用における新しい欠陥を特定し,定義する.

主な方法:

• DEAEセルロースクロマトグラフィーはステロイド受容体複合体を分析するために使用されました.
• 敏感なCEM-C7細胞系とその抵抗性サブクローン4R4.4のステロイド受容体複合体エリューションプロファイルの比較
• 安定した活性化複合体を形成する受容体の能力の評価.

主要な成果:

• 耐性4R4サブクローンからのステロイド受容体は,安定した活性化複合体を形成することができなかった.
• 耐性細胞からのステロイド受容体複合体のエリューションプロファイルは,敏感細胞のプロファイルとは異なっていた.
• 安定した活性化複合体を形成することができないのは,受容体機能の明確な欠陥である.

結論:

• 抗性4R4細胞系において,活性化可変性 (r+act1) と呼ばれる,グルココルチコイド受容体の作用における新しい欠陥が特定されました.
• この欠陥の特徴は,安定した活性化ステロイド受容体複合体を形成できないことです.
• アクティベーション可変性は,マウスのリンパ性変異体において,前述のフェノタイプ (r-, r+nt-, r+nti) と異なる.