ヒト白血球のインターフェロン活性を持つポリペプチドのE. coliにおける合成

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• 免疫学 免疫学とは
• バイオテクノロジー バイオテクノロジー

背景:

• インターフェロン (IF) は,抗ウイルス反応に不可欠です.
• IFを効率的に生産することは,バイオテクノロジーにおける大きな課題です.
• 白血球は,IF産生RNAの源である.

研究 の 目的:

• ヒトインターフェロン (IF) をコードする遺伝子をクローン化し,発現させる.
• 微生物システムで生物学的に活性なIFを生成する方法を開発する.
• クローンIF遺伝子とその発現産物について説明します.

主な方法:

• ヒト白血球からポリ (A) RNAを分離する.
• 二重鎖のcDNAの合成とE. coliのpBR322ベクトルへのクローン.
• IF mRNAを用いたクローンのハイブリダイゼーションスクリーニング.
• 細胞抽出物からの生物学的IF活性測定.

主要な成果:

• IF mRNAにハイブリッド化できる910塩基対の挿入を持つクローンが特定されました.
• 複製された挿入は,生物学的IF活性を示すポリペプチドの生産を指示しました.
• 細胞の1グラムあたり最大1万単位まで,IF活動の高収量を達成しました.

結論:

• E. coliにおけるヒトIF遺伝子のクローン化と発現に成功した.
• 生物学的に活性なインターフェロンを生成するための活性の高い微生物システムの実証.
• 治療用途のためのインターフェロンの大規模生産の可能性.