BALB/c H-2Ld遺伝子のDNA媒介遺伝子転送による同定

科学分野:

• 免疫遺伝学 免疫遺伝学とは
• 分子生物学は分子生物学である.
• ゲノミクスゲノミクスとは

背景:

• 複雑なゲノム内の特定の遺伝子を特定することは困難です.
• H-2Ldのようなメジャー・ヒストコンパティビリティ・コンプレックス (MHC) クラスI遺伝子の機能を理解することは,免疫学にとって極めて重要です.

研究 の 目的:

• ゲノムDNAから機能するBALB/c H-2Ld遺伝子を分離し確認する.
• クローン遺伝子,特に多遺伝子ファミリー内の遺伝子製品を識別する方法を実証する.
• 細胞表面認識分子の機能研究を外来細胞に発現させることで可能にします.

主な方法:

• H-2Ld遺伝子を含むBALB/cゲノムクローン (27.5) の遺伝子移植をマウスのL細胞にしました.
• 選択のためのヘルペス・シンプレックスウイルスチミジンキナーゼ (tk) 遺伝子との共変異.
• 放射性免疫検査とモノクローナル抗体を使用して発現されたLd分子の検出.
• 2次元ゲル電泳による発現されたLd分子の特徴化.

主要な成果:

• ネズミのL細胞をH-2Ld遺伝子クローンで成功裏に変異させた.
• 抗体結合によって確認された,変形した細胞の表面上のLd分子の発現.
• 発現したLd分子は,生化学的にネイティブのBALB/c Ld分子の区別がつかない.
• ゲノムクローン 27.5 は,機能する H-2Ld 遺伝子を含んでいることが確認されました.

結論:

• ゲノムクローン27.5は,機能するBALB/c H-2Ld遺伝子を持っています.
• 遺伝子転送と免疫選択は,複雑なゲノムライブラリからの遺伝子を特定し特徴づけるために堅実な方法を提供します.
• このアプローチは,細胞表面分子の異質系での発現を可能にすることで,細胞表面分子の機能分析を容易にする.