インスリンがヒトの培養リンパ球に侵入する:電子顕微鏡によるautoradiographic分析

科学分野:

• 細胞生物学 細胞生物学
• エンドクリノロジー エンドクリノロジー
• 顕微鏡技術 顕微鏡技術について

背景:

• インスリンは,グルコース代謝を調節する重要なホルモンです.
• インスリンが細胞に吸収されるメカニズムを理解することは,代謝研究にとって極めて重要です.
• 以前の研究では,インスリン結合が調査されましたが,細胞内局所化は,高度な画像処理を必要とします.

研究 の 目的:

• インスリンがヒトの培養リンパ球に細胞内に入ることを視覚化し,定量化します.
• 内化インスリンの時間経過と亜細胞分布を決定する.

主な方法:

• 人体リンパ球培養IM-9を用いた電子顕微鏡によるautoradiographsの作成.
• ヨウ素-125ラベル付インスリン ([125I]インスリン) とインキュベーション.
• 高解像度画像 (解像度半距離 ~ 0.085 μm) のためのイルフォードL-4エムルションを使用しました.

主要な成果:

• [125I]インスリンがリンパ球に時間に依存して吸収されることが示されました.
• インスリンが最大限細胞に侵入するのは,潜伏の30分後に観察された.
• 30分後には,内蔵されたインスリンの約40%がプラズマ膜から1μm以上離れた場所に位置していた.
• 細胞内インスリンは主にエンドプラズマの網膜と核膜に集中していた.

結論:

• 電子顕微鏡自動放射撮影は,細胞内の放射性標識されたリガンドを追跡するために高解像度を提供します.
• インスリンは,ヒトリンパ球に素早く侵入し,特定の細胞内臓器官に蓄積する.
• エンドプラズマ網膜と核膜は,細胞内インスリン局所化のための重要な場所です.