複製に欠陥のあるアデノウイルスベクトルを用いて,豚の心筋に直接のインビボ遺伝子転送を行います

科学分野:

• 心血管科学の研究について
• 遺伝子療法の遺伝子治療法
• 分子生物学は分子生物学である.

背景:

• 心筋細胞のための効率的な遺伝子配送方法を開発することは,心臓病を標的とした体細胞遺伝子治療にとって極めて重要です.
• ネズミと犬を対象とした以前の研究では,タンパク質の生産と大型動物への適用に関する潜在的可能性が示されましたが,定量的なデータは欠けていました.

研究 の 目的:

• 大型の動物の心臓における遺伝子発現のための複製欠陥アデノウイルス (Ad5) ベクトルの直接心内注射の有効性と安全性を評価する.
• Ad5ベクトルの遺伝子転送効率を,心筋にプラズミドDNAを注入したものと比較する.

主な方法:

• ルシフェラーゼまたはlacZレポーター遺伝子を運ぶ複製欠陥Ad5ベクターは,成人豚の心室筋に注入されました.
• 心筋機能は,超音波結晶を用いて評価された.
• レポーター遺伝子発現 (ルシフェラーゼ活性とベータ-ガラクトシダゼ染色) は,さまざまな時間点で定量化されました.

主要な成果:

• Ad5ベクトルの直接的心内注射は,地域性心筋機能を損なわなかった.
• ルシフェラゼ発現は注射後7日目にピークに達し,その後減少した.
• アデノウイルス媒介による遺伝子転送は,プラズミドDNA注射よりも14万倍効率的であり,感染した細胞はほぼすべて心筋細胞であったが,発現は注射部位から5mm以内の範囲に限定された.

結論:

• 直接の心内Ad5ベクトルの注射により,ヒトの生理学に関連した,大型動物の心筋細胞における再結合遺伝子発現が可能になります.
• アデノウイルスベクターは,心筋筋の遺伝子転送において,プラズミドDNAよりも著しく高い効率性を示しています.
• 免疫反応を克服し,臨床適用のための制限された分布を克服するために,免疫性の低いベクターのさらなる開発と改善された投与方法が必要です.