境界要素関連因子BEAF-32を用いた染色体領域の視覚化

K Zhao¹, C M Hart, U K Laemmli

¹Department of Biochemistry, University of Geneva, Switzerland.

Cell

|June 16, 1995

まとめ

研究者は,Drosophila.のscsの境界要素と結合する新しいタンパク質であるBEAF-32を特定しました. このタンパク質は染色体ドメインの組織とエンハンサー阻害活性に不可欠であり,染色体構造の役割を示唆しています.

科学分野:

分子生物学は分子生物学である.
遺伝学遺伝学とは
クロマチンの生物学

背景:

ドロソフィラのhsp70ロカスには,scsの境界要素,ドメインの隔離に不可欠な規制領域が含まれています.
境界要素の機能と結合し仲介する要因を理解することは,ゲノム組織を理解する鍵です.

研究の目的:

SCSの境界要素に結合するタンパク質を特定し,特徴づけること.
これらのタンパク質がエンハンサー阻害と染色体ドメイン構造における役割を調査する.

主な方法:

ドロソフィラからタンパク質を浄化する.
cDNAクローニングとシーケンシング.
In vivo結合測定法. インビヴォ結合測定法.
ポリテン染色体の免疫染色.
増強剤を阻害するアッセイ.

主要な成果:

scs'要素に結合する2つのタンパク質を精製し,1つはBEAF-32 (境界要素関連因子32 kDa) として識別されました.
BEAF-32は,scs'に結合するが,scs in vivoには結合しない.
免疫ステーリングは,ポリテネ染色体におけるインターバンドとパフ境界へのBEAF-32の局所化を明らかにした.
BEAF-32のパリンドロミック結合部位は境界機能に関与しているが,一時的に感染した細胞における増強剤阻害アッセイは陰性であり,クロマチンの関与を示唆している.

結論:

BEAF-32は新しいタンパク質で,scsの境界要素と結合し,インターバンドとパフ境界に局限しています.
SCSの結合部位は境界機能に作用し,おそらくBEAF-32.2によって媒介される.
クロマチンおよび/または核構造は,scsの境界要素の強化剤阻害活性に関与している可能性が高い.

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