細胞のないシステムでV(D) J再結合の開始
D C van Gent1, J F McBlane, D A Ramsden
1Laboratory of Molecular Biology, National Institute of Diabetes and Digestive and Kidney Diseases, National Institutes of Health, Bethesda, Maryland 20892, USA.
プリB細胞の核抽出物は,V(D) J再結合の際に特定の部位でDNAを裂く. 再結合RAG1およびRAG2タンパク質は,このDNA切断プロセスの重要な構成要素であり,免疫システムの発達に不可欠です.
科学分野:
- 免疫学 免疫学とは
- 分子生物学は分子生物学である.
- 遺伝学 遺伝学とは
背景:
- V(D) J再結合は適応免疫の重要なプロセスであり,多様な抗体とT細胞受容体遺伝子を生成します.
- このプロセスは,再結合信号配列 (RSS) で特定のDNA分裂を伴う.
研究 の 目的:
- プレB細胞におけるV(D) J再結合中のDNA分裂に起因する分子成分を調査する.
- V(D) J復合酵素の生化学的活性を in vitroで特徴づける.
主な方法:
- プリ-B細胞系からの核抽出物を使用した.
- DNA分裂活動を検出するために生化学的測定を行った.
- 分割された核抽出物と,再結合活性化遺伝子 (RAG) タンパク質の存在を検査した.
- 補完されたRAG1欠乏細胞の非活性抽出物と再結合RAG1タンパク質.
主要な成果:
- プレ-B細胞からの核抽出物は,RSSで特定のDNA分裂を示した.
- クリーバージ・プロダクトは,チモサイトで観察されたものと同一であった: ぼんやりした,5'-リン酸化信号端とヘアピン・コーディング端.
- 再結合RAG1タンパク質は,RAG1欠乏の抽出物における分断活性と救助活性を著しく強化しました.
- エクストラクトの分化中にRAG2タンパク質の存在と相関する裂け目活性.
結論:
- RAG1およびRAG2タンパク質は,V(D) J復合酵素複合体の重要な構成要素である.
- これらのタンパク質は,V(D) J再結合に必要な特定のDNA分裂を媒介する.
- この発見は,RAG1とRAG2が,発達中のリンパ球におけるV(D) J再結合を誘発する役割を確認した.
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