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Cdk活性化キナーゼサブユニットと転写因子TFIIHの関連付け

H Serizawa¹, T P Mäkelä, J W Conaway

¹Whitehead Institute for Biomedical Research, Nine Cambridge Center, Massachusetts 02142.

|March 16, 1995

まとめ

MO15/Cdk7とサイクリンHを含むCdk活性化キナーゼ (Cak) 複合体は,転写因子IIH (TFIIH) の成分である. この複合体はRNAポリメラーゼIIのカルボキシ末端領域 (CTD) をリン酸化し,転写と細胞サイクル制御に影響を与えます.

科学分野:

分子生物学は分子生物学である.
バイオケミストリーバイオケミストリー
細胞生物学細胞生物学

背景:

RNAポリメラーゼII大サブユニットのカルボキシ末端ドメイン (CTD) は,転写開始の調節に極めて重要です.
CTDのリン酸化は,in vivoで発生し,一般転写因子TFIIHによって,in vitroで媒介され得る.
哺乳類TFIIHにはCTDキナーゼとヘリケーゼの活性がある.

研究の目的:

精製された哺乳類TFIIH内の特定のサブユニットを特定し,そのキナーゼ活性に責任を負う.
TFIIH,Cdk活性化キナーゼ (Cak) とCTDリン酸化との機能的関係を調査する.

主な方法:

ネズミの肝臓から哺乳類のTFIIHを浄化する.
TFIIHおよびCak製剤のCTDキナーゼおよびCdk2キナーゼ活性を評価するための生化学分析.
既知のキナーゼおよびサイクリン成分を用いたTFIIHポリペプチドサブユニットの識別.

主要な成果:

精製された哺乳類TFIIHの2つのポリペプチドは,MO15/Cdk7キナーゼと,Cdk活性化キナーゼ (Cak) のサブユニットであるサイクリンHとして識別されました.
TFIIHとCAKの両方の製剤は,再結合CTDおよび再結合Cdk2タンパク質をリン酸化する能力を示しました.
TFIIH内のカックの存在が確認されました.

結論:

Cakは,哺乳類の転写因子IIH (TFIIH) 複合体の不可欠な構成要素である.
この発見は,Cakが転写調節と細胞サイクル制御の両方で二重な役割を果たしていることを示唆しています.
TFIIHのCTDキナーゼ活動は,関連するCak複合体によって媒介される可能性が高い.

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