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酵母人工染色体の生殖線伝播は,ネズミのアルファ1をカバーしています (I) コラーゲンロカス

W M Strauss¹, J Dausman, C Beard

¹Whitehead Institute for Biomedical Research, Massachusetts Institute of Technology, Cambridge 02142.

Science (New York, N.Y.)

|March 26, 1993

まとめ

研究者らは,無傷の酵母人工染色体 (YACs) をマウスに転送する新しいトランスジェニック技術を開発しました. この方法により,Col1a1遺伝子が導入され,マウスでの遺伝子識別と発現の研究が可能になりました.

科学分野:

遺伝学遺伝学とは
分子生物学は分子生物学である.
トランスジェニック技術

背景:

分子補完は遺伝子識別に不可欠です.
トランスジェニック技術は,異種DNAを生物に導入する方法を提案しています.
酵母人工染色体 (YACs) は,大きなDNA断片の転送を可能にします.

研究の目的:

健全なYACをマウスの細菌系に移植する技術を開発する.
分子補足を用いた遺伝子識別方法を確立する.
トランスジェニックマウスモデルにおける移植されたマウイン遺伝子の発現を評価する.

主な方法:

マウスの胚性幹細胞 (ES) へのYAC移植技術の開発.
ネズミのCol1a1遺伝子を含んだ150キロ塩基のYACをリポフェクションで介在してES細胞に導入する.
感染したES細胞からキメリック・ファウンダー・マウスの誘導と,その後の生殖によって生殖線を伝播する.
トランスゲン発現の可視化と,リボヌクレアース保護分析を用いた定量化.

主要な成果:

ES細胞に全長YACを効率的に導入する.
細菌系を通してトランスゲンを伝達したキメリックマウスの成功する世代.
Col1a1 YAC.を携えている2つの変異遺伝子マウス株の確立.
トランスゲン発現が検出され,定量化され,内生的なコラーゲン遺伝子と比較できるレベルを示しました.

結論:

開発されたYAC転送技術は,マウスの生殖系に大きく,無傷な遺伝子を導入するのに有効です.
この技術は,遺伝子識別と遺伝子機能の研究のための分子補完をin vivoで容易にします.
Col1a1遺伝子を内在的なレベルで発現するトランスジェニックマウスは成功裏に生成され,さらなる研究のための貴重なモデルを提供しました.

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